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8 Cours

BT2

Genie genetique

Le terme Génie génétique regroupe les techniques de construction avec l'ADN et représente de ce fait une application majeure de la biologie moléculaire. Le but principal de ces techniques est d'isoler, par clonage moléculaire, des loci génomiques (gènes ou autres séquences) afin de les étudier, ou de les modifier (par mutagénèse par exemple), ou bien de les transférer à un autre organisme, ou encore de produire leurs produits d'expression in vivo par biotechnologie…etc. La connaissance de ces techniques moléculaires de base, constitue un pré-requis indispensable à la compréhension ultérieure de divers domaines relevant aussi bien, de la biotechnologie moléculaire (transgénèse, production in vivo et in vitro de protéines d'intérêt thérapeutique ou industriel…), que de la recherche fondamentale (analyses fonctionnelles des génomes, conception de modèles animaux d'études de maladies génétiques, analyses transcriptomiques des gènes…).

Ce cours décrit les outils moléculaires et les techniques permettant d'isoler des séquences d'ADN. La première leçon, intitulée Technologie de l'ADN recombinant, porte sur l'isolement de l'ADN via le clonage moléculaire. Nous examinerons, lors de la deuxième leçon, les méthodes utilisées pour isoler des gènes spécifiques, et ce, par criblage des banques, jusqu'à l'utilisation plus récente de la PCR en passant par les hybridations moléculaires in situ. Dans la troisième et dernière leçon, nous allons voir de quelle façon disposer d'un gène isolé sous la forme d'un clone ouvre diverses perspectives expérimentales. Il sera question ici de traiter deux perspectives majeures, elles-mêmes pouvant être considérées comme d'importantes applications du génie génétique : la modification in vitro de la séquence génique par la mutagénèse dirigée et les techniques d'étude du polymorphisme de l'ADN. Des travaux dirigés, traitant des différents enseignements de ce cours, sont également proposés.