Genie genetique
Le terme Génie génétique regroupe les techniques de construction avec l'ADN et représente de ce fait une application majeure de la biologie moléculaire. Le but principal de ces techniques est d'isoler, par clonage moléculaire, des loci génomiques (gènes ou autres séquences) afin de les étudier, ou de les modifier (par mutagénèse par exemple), ou bien de les transférer à un autre organisme, ou encore de produire leurs produits d'expression in vivo par biotechnologie…etc. La connaissance de ces techniques moléculaires de base, constitue un pré-requis indispensable à la compréhension ultérieure de divers domaines relevant aussi bien, de la biotechnologie moléculaire (transgénèse, production in vivo et in vitro de protéines d'intérêt thérapeutique ou industriel…), que de la recherche fondamentale (analyses fonctionnelles des génomes, conception de modèles animaux d'études de maladies génétiques, analyses transcriptomiques des gènes…).
Ce
cours décrit les outils moléculaires et les techniques permettant d'isoler des
séquences d'ADN. La première leçon, intitulée Technologie de l'ADN recombinant,
porte sur l'isolement de l'ADN via le clonage moléculaire. Nous examinerons, lors de la deuxième leçon, les
méthodes utilisées pour isoler des gènes spécifiques, et ce, par criblage des banques, jusqu'à l'utilisation
plus récente de la PCR en passant par les hybridations moléculaires in situ. Dans la troisième et dernière leçon, nous allons
voir de quelle façon disposer d'un gène isolé sous la forme d'un clone ouvre
diverses perspectives expérimentales. Il sera question ici de traiter deux
perspectives majeures, elles-mêmes pouvant être considérées comme d'importantes
applications du génie génétique : la modification in vitro de la
séquence génique par la mutagénèse dirigée et les techniques d'étude du
polymorphisme de l'ADN. Des travaux dirigés, traitant des différents enseignements
de ce cours, sont également proposés.